菜粉蝶HSP20基因的克隆及温度胁迫下表达分析

作者:袁远张连根高熹吴国星张慧龙华朱家位

关键词: 菜粉蝶; 热激蛋白; HSP20; 基因克隆; 序列分析; 温度胁迫; 表达分析;

摘要：【目的】克隆分析菜粉蝶(Pieris rapae)热激蛋白20基因(HSP20),并检测其在温度胁迫下的表达情况,为探析菜粉蝶适应温度胁迫机制提供参考。【方法】以菜粉蝶为试验材料,采用RT-PCR和RACE克隆获得菜粉蝶HSP20基因cDNA全长,并通过生物学软件分析其序列,明确其基因结构特征和亲缘关系;采用实时荧光定量PCR检测菜粉蝶HSP20基因在低温(-20～0℃)和高温(5～45℃)胁迫下的表达响应。【结果】菜粉蝶HSP20基因全长725 bp,5’-端非编码区105 bp,3’-端非编码区109 bp,开放阅读框531 bp,编码176个氨基酸,预测蛋白分子量19.5 kD,理论等电点6.61;其编码氨基酸序列中含有1个典型的HSP20家族结构域(位于第60～142位氨基酸)、1个α-晶体蛋白(位于第60～157位氨基酸)和1个Allato allatostatin(位于第14～24位氨基酸);基序列相似度分析其与二化螟、家蚕和甘蓝夜蛾HSP20蛋白氨基酸相似度较高并聚为一族。该基因随环境温度的升高或降低发生变化,在-5和40℃诱发该基因高效表达。【结论】低温和高温均能诱导菜粉蝶HSP20基因高效表达。

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菜粉蝶HSP20基因的克隆及温度胁迫下表达分析

作者:袁远 张连根 高熹 吴国星 张慧 龙华 朱家位

关键词: 菜粉蝶; 热激蛋白; HSP20; 基因克隆; 序列分析; 温度胁迫; 表达分析;

作者:袁远张连根高熹吴国星张慧龙华朱家位