鸭ChREBP基因表达载体构建及其对原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响

作者:谭光辉覃媛钰王单单李万贵罗华伦吴磊李杰章张依裕

关键词: 鸭 ChREBP基因鸭原代肝细胞 PC3细胞脂质代谢

摘要：【目的】探究鸭原代肝细胞脂质含量与碳水化合物反应元件结合蛋白基因(ChREBP)表达的关联性,为深入研究ChREBP基因对畜禽脂质代谢的遗传调控机制提供参考依据。【方法】采用Ⅳ型胶原酶消化法分离孵化21 d的鸭胚原代肝细胞,以DMEM高糖培养基进行培养。利用RT-PCR扩增鸭ChREBP基因编码区(CDS)序列,构建携带His标签的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His,通过脂质体法分别转染鸭胚原代肝细胞和人前列腺癌细胞(PC3);采用His标签检测试剂盒检测ChREBP基因的表达量,以脂质指标测定试剂盒测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量,并分析鸭胚原代肝细胞和PC3细胞中ChREBP基因表达与脂质指标含量的相关性。【结果】以构建的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His转染鸭原代肝细胞和PC3细胞均能发出绿色荧光,表明携带His标签的ChREBP基因能在鸭原代肝细胞和PC3细胞中表达。ChREBP基因表达量与鸭原代肝细胞和PC3细胞中的TG、TC和HDL含量均呈极显著正相关(P<0.01,下同),与LDL含量呈极显著负相关。【结论】以构建的真核表达载体pEGFP-N3-ChREBP-His转染鸭原代肝细胞和PC3细胞后均能发出绿色荧光,说明ChREBP基因表达对鸭原代肝细胞和PC3细胞中的脂质代谢作用机理相似,可促进细胞脂质累积。

上一篇：猪基因表达调控数据库(GereDB)的构建
下一篇：全雌吉富罗非鱼家系选育及其生长性能分析

鸭ChREBP基因表达载体构建及其对原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响

作者:谭光辉 覃媛钰 王单单 李万贵 罗华伦 吴磊 李杰章 张依裕

关键词: 鸭 ChREBP基因 鸭原代肝细胞 PC3细胞 脂质代谢

作者:谭光辉覃媛钰王单单李万贵罗华伦吴磊李杰章张依裕

关键词: 鸭 ChREBP基因鸭原代肝细胞 PC3细胞脂质代谢